primer annealing temperature 簡易算法

primer annealing temperature 簡易算法

(A/T)×2 + (C/G)×4　　為melting temperature

(A/T)×2 + (C/G)×4 - 5  為annealing temperature

例: GAATGAATCCTATGTCGGCG 一共20 bp，一共有10個A或G，10個C或G，

melting temperature為
10×2 + 10×4 = 60˚C

annealing temperature為再減5度
10×2 + 10×4 - 5 = 55˚C